Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio selectivo y diferencial para Enterobacterias lactosa positivas. Este medio también es conocido como Agar EMB por sus siglas en inglés.
El uso de la eosina y del azul de metileno permite la diferenciación de las colonias fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras, esto permite distinguir algunos géneros como Salmonella y Shigella que se aprecian incoloras. La sacarosa está incluida en el medio para detectar a los miembros del grupo coliforme que fermentan más rápidamente la sacarosa que la lactosa, y las colonias se verán de color púrpura y pueden presentar un centro oscuro, además, estarán rodeadas de una zona incolora. Estos dos colorantes que se adicionan al medio también inhiben el crecimiento de la flora acompañante, principalmente las Gram-positivas.
Este medio se considera superior al Agar ENDO, ya que resulta ser un medio más sensible, estable y seguro, permite una diferenciación más temprana entre las colonias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa.
El Agar EMB es una combinación de la fórmula original y la de Levine donde las peptonas proveen la fuente de nitrógeno, la eosina y el azul de metileno son colorantes que se combinan para formar un precipitado a pH ácido. Los colorantes actúan como inhibidores e indicadores. Los carbohidratos proporcionan la fuente de energía, los
fosfatos actúan como buffer y el agar como agente solidificante.
Método
Suspender 36 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar bien y calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°C y vaciar en placas de Petri estériles.
Procedimiento
1. Sembrar las muestras de acuerdo a los procedimientos internos de laboratorio.
2. Incubar las placas 35 + 2°C durante 24 a 48 horas y observar el crecimiento.
